人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM)Elisa试剂盒是尊龙凯时推出的一款专用于科学研究的产品,严禁用于医学诊断。该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),具有高灵敏度和特异性。
试剂盒原理
试剂盒的工作原理是:将标本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,然后进行温育和全面洗涤。通过底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下由蓝色转化为黄色,颜色的深浅与样品中的adropin(AD)浓度呈正相关。最终通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)并计算样品浓度。
试剂盒组成
试剂盒包括以下组件: - 微孔酶标板:96孔配置(12孔×8条)或48孔配置(12孔×4条) - 标准品:03mL*6管 - 样本稀释液:6mL(96孔)或3mL(48孔) - 检测抗体-HRP:10mL(96孔)或5mL(48孔) - 20×洗涤缓冲液:25mL(96孔)或15mL(48孔) - 底物A:6mL(96孔)或3mL(48孔) - 底物B:6mL(96孔)或3mL(48孔) - 终止液:6mL(96孔)或3mL(48孔) - 封板膜:2张 - 说明书:1份 - 自封袋:1个
保存条件
试剂盒应在2-8℃条件下保存,有效期为6个月。
样品收集及处理
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激。血液收集后,3000转离心10分钟,迅速分离血清和红细胞。 2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,3000转离心30分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织与生理盐水混合并搅拌均匀,3000转离心10分钟取上清。 5. 保存:如未及时检测样品,应按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融,解冻时应确保样品充分均匀。
必备设备
1. 酶标仪(450nm)。 2. 高精度加样器及枪头:05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL。
操作注意事项
1. 从冷藏环境中取出的试剂盒需在室温下平衡15-30分钟后再使用,未用完的酶标板应置于密封袋中保存。 2. 洗涤液可能出现结晶,稀释时可加热帮助溶解。 3. 各步加样需使用加样器,并定期校对,以避免误差。一批样品的加样建议控制在5分钟内。 4. 每次检测时都要制作标准曲线,推荐进行复孔检测。如样品OD值超过标准品孔的第一孔OD值,需先行稀释后再测定。 5. 封板膜仅可使用一次以防交叉污染。 6. 严格按照说明书操作,实验结果需以酶标仪的读数为准。 7. 底物需避光保存。 8. 所有样品及废弃物需按感染性物质处理。 9. 不同批次的试剂成分不可混用。
温馨提示:尊龙凯时提供代测服务,凡购买本公司Elisa试剂盒均可享受免费的Elisa代测服务。如需详细信息,请咨询销售经理或在线客服。