重组蛋白的保存形式主要包括冻干粉和溶液态两种，其中由原核细胞表达的重组蛋白通常以冻干粉的形式储存，而真核细胞表达的重组蛋白则以溶液状态保存。这种保存方式使得重组蛋白具有极高的稳定性，可以在-80℃的条件下保存数年。冻干粉在使用之前需要进行溶解，而溶解的方法是关键环节，因为不当的溶解可能会降低蛋白质的活性和效用。此外，在冻融及稀释过程中，溶液态的重组蛋白也需要仔细处理。这些都是用户在实际应用中频繁遇到的挑战。

1. 原核细胞表达的重组蛋白：以大肠杆菌表达的冻干重组蛋白为例，经过提纯并添加蛋白保护剂后，使用经过过滤的无菌水作为复溶剂。对于100ug的冻干蛋白，推荐用86ul的超纯水轻轻摇晃促使其溶解，之后用移液枪轻轻吹打几下即可完全溶解，务必避免使用涡旋仪进行剧烈搅拌。

2. 真核细胞表达的重组蛋白: 具备生物活性的蛋白质不仅需要转录和翻译，还需经过翻译后的加工，以维持其正确的空间结构，因此重组蛋白应在真核细胞内生产。以哺乳动物细胞为例，它们有能力识别并去除基因内的内含子，对翻译后的蛋白质进行加工，从而确保表达的蛋白质具备活性。采用溶液态保存方式，能够有效保持其活性与稳定性。

3. 重组蛋白的保护剂：在冻干和储存过程中，常用的保护剂或稳定剂包括糖类、多元醇、聚合物、表面活性剂，以及某些蛋白质和氨基酸等。我们通常选用8%（质量比体积）的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖能够显著抑制蛋白质二级结构的变化，对冻干过程中蛋白质的伸展与聚集也有良好的防护作用，而甘露醇则是一种广泛应用的冻干保护剂与填充剂。

如需了解更多关于重组蛋白的保存与应用信息，欢迎访问尊龙凯时，我们致力于提供优质的生物医药解决方案与产品。